随着病理学科的快速发展和精准诊疗时代的到来，病理诊断作为疾病诊断的金标准, 发挥着日益重要的作用。与此同时，精准治疗的不断进步，也推动了对病理科精准化、规范化检测的发展。因此，甄选有效生物标志物以及病理检测方法，是精准筛选出潜在获益人群，并决定疾病治疗成功与否的关键。

    近日，在第十二届中国病理医师年会召开之际，中国人民解放军总医院石怀银教授、南京大学医学院附属鼓楼医院樊祥山教授、天津医科大学肿瘤医院孟斌教授等专家共同出席了罗氏诊断的卫星会，围绕微卫星不稳定性（MSI）及 EBV 检测在病理诊断中的价值与应用等话题进行了深入的解读和探讨。

    石怀银教授担任会议主席并指出：随着精准诊疗时代的到来，临床对病理检测的要求也越来越高，精确、高效、规范的病理诊断至关重要——病理及临床医生有必要了解相关鉴别及预后标志物的临床意义，通过精准检测综合分析肿瘤的不同病理类型、基因突变情况、不同分期及患者个人状况等制定出个体化诊疗方案，提升治疗效果。

一、优选 MSI/MMR 检测方法，助力肿瘤精准诊疗

    微卫星又称简单重复序列（SSR），是一些短而重复的 DNA 序列，一般由 1－6 个核苷酸组成，串联重复排列。DNA 复制时插入或缺失突变引起的微卫星序列长度改变的现象，常由错配修复（MMR）功能缺陷引起，称为微卫星不稳定性（MSI）。

    MSI 现象于 1993 年被 Jacobs 等人在结直肠癌中首次发现，越来越多研究表明，MSI 与子宫内膜癌、结直肠癌、卵巢癌、胃癌、肝细胞癌、黑色素瘤肿瘤的发生密切相关，尤其是评估结直肠癌治疗疗效、预后以及制定辅助治疗方案的重要生物标志物。

林奇综合症属于最常见的遗传性结直肠癌，发病年龄较年轻且患者预后较好，因此，应对新诊断的结直肠癌患者进行林奇综合症筛查，并对于高度怀疑为林奇综合症患者及其亲属进行相关基因胚系突变检测来证实，以实现早筛查、早诊断、早治疗的目的。樊祥山教授表示，此外，近年来，免疫治疗相关研究发现，当肿瘤细胞中存在 MMR 缺失（dMMR）/MSI 时，肿瘤细胞内将累积大量基因突变，某些突变（新抗原）有可能被免疫系统识别和攻击，从而对 PD-1 免疫治疗有较好应答。因此，MSI/MMR 检测除了可提供关键性诊断及预后信息，对于预测 PD-1 单抗免疫治疗在癌细胞治疗中的效益也具有重要价值。

    美国国立综合癌症网络（NCCN）指南、中国临床肿瘤学会（CSCO）指南均推荐所有结直肠癌患者进行 MMR 或 MSI 检测。同时，在 2019 版的更新 NCCN 指南中，推荐 Pembrolizumab 用于 dMMR/MSI-H 结直肠癌、子宫内膜癌等实体肿瘤晚期治疗，推荐 Nivolumab 用于 dMMR/MSI-H 结直肠癌晚期治疗。

    目前，微卫星不稳定检测方法包括 PCR 检测 MSI、免疫组化检测 MMR 蛋白及 NGS 检测。樊祥山教授强调：综合病理科情况，IHC 是病理实验室检测微卫星不稳定的首要筛查手段，建议使用 PMS2,MSH6,MLH1 和 MSH2 的抗体套餐来检测 MMR 状态。对有条件的实验室，目前常用的 MSI 检测方法是 PCR 结合 IHC 检测，以保证检测精准性。同时，在 MMR 的免疫组化检测过程中应注意使用规范的判读标准以及内外部对照。

二、EBER ISH 检测有效辅助诊断 EBV 感染相关疾病

    EB 病毒（EBV）是一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒，在人群中感染非常普遍。EBV 感染在不同感染状态表达不同抗原：病毒增殖感染相关抗原包括 EBV 早期抗原（EA）、EBV 病毒壳抗原（VCA）和 EBV 膜抗原（MA）；病毒潜伏感染时表达的抗原有 EBV 核抗原（EBNA）和 EBV 潜伏膜蛋白（LMP），其中 LMP 包括 LMP1、LMP2，是目前唯一证实的 EBV 恶性转化基因。

    EBV 感染口咽部上皮及局部浸润 B 淋巴细胞，大量繁殖并进入血液循环而造成全身性感染，并可长期潜伏在人体淋巴组织中，形成记忆 B 细胞库，当机体免疫功能低下时，潜伏的 EBV 活化可造成复发感染。EBV 感染与多种疾病相关，包括淋巴造血系统和非淋巴造血系统两类：

    EBV 检测除了在熟知的 NK/T 细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌和胃癌等的诊断中使用，在其他一些相关疾病，尤其是 EBV 感染相关淋巴组织增殖性疾病中的应用不容忽视，在这些疾病中常常造成误诊或漏诊。

    现阶段可通过血清学检测 EBV 相关抗体及病毒 DNA 拷贝数辅助诊断，对于病变组织检测方法主要包括免疫组化（IHC）和原位杂交（ISH），孟斌教授强调：IHC 方法简便易行，可检测 LMP1 和 EBNA1 等 EBV 表达的蛋白抗原，但在不同感染状态这些抗原表达不一，严重影响了检测的敏感性。EBER 是 EBV 表达的小 RNA，在 EBV 各种感染状态下都有表达，因此应用 ISH 方法检测 EBER 对诊断 EBV 感染具有高度敏感性和特异性，是公认的诊断金标准，得到了包括 NCCN 在内的多个诊疗指南的推荐。